Diseño y evaluación de tres oligonucleótidos para la detección de Leishmania por PCR

Authors

  • Omar Cáceres Rey División de Biología Molecular, Centro Nacional de Salud Pública, Instituto Nacional de Salud. Lima - Perú
  • Ysabel Montoya Piedra División de Biología Molecular, Centro Nacional de Salud Pública, Instituto Nacional de Salud. Lima - Perú

DOI:

https://doi.org/10.17843/rpmesp.2002.193.815

Keywords:

Leishmaniasis/diagnóstico, Leishmania/genética, Oligonucleótidos/uso diagnóstico, Reacción en cadena de la polimerasa/métodos

Abstract

La leishmaniasis afecta la salud pública en 88 países del mundo y representa un serio obstáculo para su desarrollo socioeconómico. Los métodos para diagnosticar la enfermedad toman tiempo y muchas veces son traumáticos para el paciente. Objetivo: Se aplicó PCR como método alternativo para el diagnóstico rápido de esta enfermedad. Materiales y métodos: A diferentes especies de Leishmania se les extrajo ADN genómico. Se diseñaron tres oligonucleótidos (LEISH 1, LEISH 2 y LEISH 3) dirigidos al extremo carboxilo terminal de la histona H2B de Leishmania (V.) peruviana cuya secuencia parcial sirvió para diseñar dichos oligos, los cuales fueron probados en un sistema de PCR . Resultados: Los oligonucleótidos amplificaron exitosamente regiones de 123 pb (LEISH 1 / LEISH 2) y 139 pb (LEISH 1 / LEISH 3) de esta secuencia parcial utilizada. La sensibilidad del PCR fue de hasta 1 fg de ADN purificado de L. (V.) peruviana y de 2 parásitos cuando se realizó la técnica de manera directa. La especificidad fue 100% (solo reconoció a Leishmania y no a Trypanosoma ni a humano). Los oligonucleótidos diseñados también amplificaron todas las especies de Leishmania evaluadas. Conclusión: El sistema de PCR diseñado puede ser aplicado en la detección del parásito a partir de cualquier tipo de muestra convirtiéndose en un método alternativo de diagnóstico de la enfermedad por su rapidez, especificidad y sensibilidad.

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Published

2002-01-01

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Section

Research Articles

How to Cite

1.
Cáceres Rey O, Montoya Piedra Y. Diseño y evaluación de tres oligonucleótidos para la detección de Leishmania por PCR. Rev Peru Med Exp Salud Publica [Internet]. 2002 Jan. 1 [cited 2024 Nov. 2];19(3). Available from: https://rpmesp.ins.gob.pe/index.php/rpmesp/article/view/815