Caracterización de las mutaciones en el gen rpoB asociadas a la resistencia a rifampicina en pacientes con Tuberculosis pulmonar

Abstract

Antecedentes: La resistencia a rifampicina en M. tuberculosis involucra mutaciones en el gen rpoβque codifica a la subunidad ß de la ARN polimerasa. Objetivo: Identificar las mutaciones del gen rpoβ, en cepas de M. tuberculosis asociadas con resistencia a rifampicina aisladas de la Subregión de Salud Lima Norte, Perú. Materiales y métodos: Se cultivó en Lowestein - Jenseen 73 muestras de esputo de pacientes con tuberculosis pulmonar. A 62, con más de 10 colonias por tubo, se les comprobó susceptibilidad a isoniazida, rifampicina, estreptomicina y etambutol. Se realizó la extracción de ADN por PCR, clonación en el vector pGEM-T, transformación, selección de clonas recombinantes y secuenciamiento del ADN plasmídico para la determinación de los polimorfismos del gen rpoβ . Resultados: 52 (83,9%) cepas fueron resistentes a rifampicina (Rifr) y 10 (16,1%) susceptibles (Rifs). Se encontró alteraciones en el gen rpoβ en 51 de 52 cepas Rifr Se identificaron 20 mutaciones. Las mutaciones más frecuentes fueron encontradas en los codones Ser-531 (62,7%), His-526 (15,7%), Asp-516 (11,8%) y Gln-513 (5,9%). No se observó mutación alguna en las 10 cepas Rifs. 94,2% de nuestras cepas Rifr fueron también resistentes a isoniazida. Conclusiones: Se encontraron mutaciones en el gen rpoB de casi todas las cepas Rifr; asimismo, casi todas las cepas Rifr fueron también resistentes a isoniazida.