Estandarización de una prueba de PCR para la detección de Brucella sp.

Authors

  • Carlos Padilla R. División de Biología Molecular. Instituto Nacional de Salud. Cápac Yupanqui 1400, Jesús María, Lima, Perú.
  • Ysabel Montoya P. División de Biología Molecular. Instituto Nacional de Salud. Cápac Yupanqui 1400, Jesús María, Lima, Perú.
  • Carlos Carrillo P. Departamento de Microbiología. Universidad Peruana Cayetano Heredia. Lima, Perú.

DOI:

https://doi.org/10.17843/rpmesp.2003.202.897

Keywords:

Reacción en Cadena de la Polimerasa, Brucella, ADN

Abstract

Objetivo: Estandarizar una prueba de PCR para la detección de Brucella spp. Materiales y métodos: Se usó oligonucleótidos reportados que amplifican la secuencia de 16S rRNA de Brucella spp. Fueron evaluados dos métodos de extracción de ADN: fenol-cloroformo-alcohol isoamílico y un kit comercial basado en columnas con afinidad. Para determinar la sensibilidad de la prueba se usó 8 cepas peruanas de Brucella y para determinar la especificidad de la prueba se usó otras cepas bacterianas peruanas de E. coli, Shigella, Proteus mirabilis, Salmonella paratyphi, Salmonella typhi, Citrobacter freundii y Vibrio cholerae. Resultados: Los 2 métodos de extracción de ADN evaluados fueron efectivos. La sensibilidad analítica de la prueba es alta, lográndose detectar 80 femtogramos de ADN de Brucella spp. purificado. Todas las cepas peruanas de Brucella spp. fueron detectadas por la prueba. Además, la prueba es negativa para cepas peruanas de otras especies bacterianas. Conclusión: Se ha estandarizado las condiciones de una prueba de PCR para la detección de cepas peruanas de Brucella spp., la cual es muy sensible y específica en el laboratorio.

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Published

2003-01-01

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Section

Research Articles

How to Cite

1.
Padilla R. C, Montoya P. Y, Carrillo P. C. Estandarización de una prueba de PCR para la detección de Brucella sp. Rev Peru Med Exp Salud Publica [Internet]. 2003 Jan. 1 [cited 2024 Nov. 2];20(2). Available from: https://rpmesp.ins.gob.pe/index.php/rpmesp/article/view/897

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