Estudio ultraestructural de Leptospira biflexa serovar Andamana cepa JNS al microscopio electrónico de transmisión y barrido

Abstract

Objetivos: Investigar la ultraestructura de Leptospira biflexa serovar Andamana cepa JNS, por la técnica de réplica metálica, cortes ultrafinos y tinción negativa al microscopio electrónico de transmisión (MET) y barrido (MEB) en alta y ultraalta resolución. Materiales y métodos: Cultivos en fase logarítmica 12-15x106 cel/mL del serovar Andamana cepa JNS, aislada de un paciente. Se aplicaron los métodos de tinción negativa, cortes ultrafinos y réplica metálica para la microscopía electrónica de transmisión. Para la microscopía electrónica de barrido se usaron las técnicas en alta y ultraalta resolución de muestras cubiertas con oro y platino. Resultados: Con el método de réplica metálica se definió la estructura externa en células individuales de Leptospira biflexa serovar Andamana al MET. Mediante la técnica de tinción negativa se observó la membrana externa formada por tres capas, los filamentos axiales, la membrana citoplasmática, el citoplasma granular con inclusiones electronodensas, las formaciones «globosas», la «estructura terminal», «apéndices terminales», además de las inclusiones permeables para los electrones, claramente definidas. La morfología clásica del microorganismo fue observada en cortes finos, y al microscopio electrónico de barrido. Conclusiones: Se reporta por primera vez la técnica de réplica metálica para determinar la morfología externa en células individuales de Leptospira biflexa serovar Andamana JNS, la cual ofrece resultados ventajosos en comparación con otros métodos. La ultraestructura, y las inclusiones permeables para electrones dentro del citoplasma a una magnificación de 120000x 20KV fueron nítidamente observadas por tinción negativa. La estructura helicoidal del microorganismo se comprobó al MEB.