Uso de partículas magnéticas en la purificación de anticuerpos IgM contra Taenia solium

L. Agueda Perez; Yesenia Castillo; Cindy Espinoza; Luz M. Toribio; Yesica Santos; Kevin S. Martel; Patricia P. Wilkins; Javier A. Bustos; Hector H. Garcia; Yagahira E. Castro-Sesquen; Grupo de Trabajo en Cisticercosis en Perú

doi:10.17843/rpmesp.2020.371.4628

Autores/as

L. Agueda Perez Laboratorio de Inmunología Parasitaria, Facultad de Ciencias y Filosofía, Universidad Peruana Cayetano Heredia, Lima, Perú. Biólogo. Grupo de Trabajo en Cisticercosis en Perú: otros miembros incluyen: Robert H. Gilman, MD, DTMH; Armando E. Gonzalez, DVM, PhD; y Victor C.W. Tsang, PhD (Coordination Board); Silvia Rodriguez, MSc; Isidro Gonzalez, MD; Herbert Saavedra, MD; Sofia Sanchez, MD; Manuel Martinez, MD (Instituto Nacional de Ciencias Neurológicas, Lima, Perú); Manuela Verastegui, PhD; Mirko Zimic, PhD; Saul Santivañez, MD, PhD; Holger Mayta, PhD; Monica Pajuelo, PhD; Gianfranco Arroyo, DVM, MSc (Universidad Peruana Cayetano Heredia, Lima, Perú); Maria T. Lopez, DVM, PhD; Luis Gomez, DVM; Ana Vargas, DVM; Cesar M. Gavidia, DVM, PhD (School of Veterinary Medicine, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Lima, Perú); Luz M. Moyano, MD; Ricardo Gamboa, MSc; Claudio Muro; Percy Vichez, MSc (Cysticercosis Elimination Program, Tumbes, Perú); Seth O´Neal, MD, MPH (Oregon Health and Sciences University, Portland, USA); Sukwan Handali, MD; John Noh (Centers for Disease Control, Atlanta, USA); Theodore E. Nash, médico; Siddhartha Mahanty, MD, PhD (NIAID, NIH, Bethesda, MD); Jon Friedland (Imperial College, London, UK).
Yesenia Castillo Laboratorio de Inmunología Parasitaria, Facultad de Ciencias y Filosofía, Universidad Peruana Cayetano Heredia, Lima, Perú. Biólogo
Cindy Espinoza Laboratorio de Inmunología Parasitaria, Facultad de Ciencias y Filosofía, Universidad Peruana Cayetano Heredia, Lima, Perú. Biólogo.
Luz M. Toribio Laboratorio de Inmunología Parasitaria, Facultad de Ciencias y Filosofía, Universidad Peruana Cayetano Heredia, Lima, Perú. Unidad de Cisticercosis, Instituto Nacional de Ciencias Neurológicas, Lima, Perú. Biólogo.
Yesica Santos Laboratorio de Inmunología Parasitaria, Facultad de Ciencias y Filosofía, Universidad Peruana Cayetano Heredia, Lima, Perú. bachiller en Tecnología Médica
Kevin S. Martel Laboratorio de Inmunología Parasitaria, Facultad de Ciencias y Filosofía, Universidad Peruana Cayetano Heredia, Lima, Perú. bachiller en Biología
Patricia P. Wilkins Parasitology Services, Big Pine Key, Florida, Estados Unidos. PhD en Bioquímica y Biología Molecular
Javier A. Bustos Centro de Salud Global, Universidad Peruana Cayetano Heredia, Lima, Perú. Unidad de Cisticercosis, Instituto Nacional de Ciencias Neurológicas, Lima, Perú. médico, maestría en Salud Pública.
Hector H. Garcia Laboratorio de Inmunología Parasitaria, Facultad de Ciencias y Filosofía, Universidad Peruana Cayetano Heredia, Lima, Perú. Centro de Salud Global, Universidad Peruana Cayetano Heredia, Lima, Perú. Unidad de Cisticercosis, Instituto Nacional de Ciencias Neurológicas, Lima, Perú. médico, PhD en Salud Pública
Yagahira E. Castro-Sesquen Department of International Health, Johns Hopkins Bloomberg School of Public Health, Baltimore, Estados Unidos. microbióloga, PhD en Salud Pública.
Grupo de Trabajo en Cisticercosis en Perú Grupo de Trabajo en Cisticercosis en Perú: otros miembros incluyen: Robert H. Gilman, MD, DTMH; Armando E. Gonzalez, DVM, PhD; y Victor C.W. Tsang, PhD (Coordination Board); Silvia Rodriguez, MSc; Isidro Gonzalez, MD; Herbert Saavedra, MD; Sofia Sanchez, MD; Manuel Martinez, MD (Instituto Nacional de Ciencias Neurológicas, Lima, Perú); Manuela Verastegui, PhD; Mirko Zimic, PhD; Saul Santivañez, MD, PhD; Holger Mayta, PhD; Monica Pajuelo, PhD; Gianfranco Arroyo, DVM, MSc (Universidad Peruana Cayetano Heredia, Lima, Perú); Maria T. Lopez, DVM, PhD; Luis Gomez, DVM; Ana Vargas, DVM; Cesar M. Gavidia, DVM, PhD (School of Veterinary Medicine, Universidad Nacional Mayor de San Marcos, Lima, Perú); Luz M. Moyano, MD; Ricardo Gamboa, MSc; Claudio Muro; Percy Vichez, MSc (Cysticercosis Elimination Program, Tumbes, Perú); Seth O´Neal, MD, MPH (Oregon Health and Sciences University, Portland, USA); Sukwan Handali, MD; John Noh (Centers for Disease Control, Atlanta, USA); Theodore E. Nash, médico; Siddhartha Mahanty, MD, PhD (NIAID, NIH, Bethesda, MD); Jon Friedland (Imperial College, London, UK).

DOI:

https://doi.org/10.17843/rpmesp.2020.371.4628

Palabras clave:

Purificación, Concentración, Taenia solium, Cisticercosis, Anticuerpos Monoclonales, Perú

Resumen

Se evaluó el uso de partículas magnéticas acopladas a proteína L para la concentración y purificación de anticuerpos monoclonales inmunoglobulina M (mIgM) contra Taenia solium. Se evaluaron tres métodos de concentración y diferentes tiempos de elución y se optimizó la proporción de partículas a la proporción de mIgM. Demostramos que: 1) con el uso partículas magnéticas no se requiere de una concentración previa de mIgM, lo que disminuye la manipulación de los anticuerpos y mejora la recuperación, 2) se puede omitir el uso de un tampón de unión, ya que el pH de la mayoría de los sobrenadantes de cultivo celular son neutros, y 3) se necesitan tiempos de elución más largos (~45 minutos) para aumentar la recuperación a un nivel mayor a 80%. El estudio demuestra que el uso de partículas magnéticas acopladas a proteína L es una herramienta simple y eficiente para la concentración y purificación de mIgM.